PCR技術(shù)的更新?lián)Q代，似乎都遵循了這樣一個(gè)規(guī)律，那就是新一代試劑盒或多或少會(huì)解決上一代技術(shù)存在的問(wèn)題，如檢測(cè)敏感性逐漸得到提升、檢測(cè)步驟逐漸得到簡(jiǎn)化、實(shí)驗(yàn)室污染逐漸得到控制。

　　一代試劑盒采用電泳法進(jìn)行結(jié)果鑒定，那時(shí)實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)污染還沒(méi)有清楚的認(rèn)識(shí)，當(dāng)從“飲水中”也擴(kuò)增出“結(jié)核桿菌”時(shí)，才意識(shí)到問(wèn)題的嚴(yán)重性，于是暫停PCR技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用。人們把污染的癥結(jié)歸為“電泳”二字，隨后出現(xiàn)了“ELISA-PCR”或雜交梳等核酸檢測(cè)方法，由于同樣是產(chǎn)物開(kāi)放性鑒定，并沒(méi)有改變污染成災(zāi)的事實(shí)，反而使人們對(duì)PCR技術(shù)能否用于臨床診斷產(chǎn)生質(zhì)疑。

　　二代熒光PCR技術(shù)的產(chǎn)生，由之前的開(kāi)放性核酸鑒定方法，變成由熒光染料或Taq MAN探針為信號(hào)源的閉管鑒定，避免了擴(kuò)增產(chǎn)物外泄的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，事實(shí)證明實(shí)驗(yàn)室污染并沒(méi)有得到*控制，一些研究人員認(rèn)為煮沸得來(lái)的核酸干擾物質(zhì)太多，是影響檢測(cè)敏感性的主要原因。

　　三代試劑盒“微量核酸釋放劑”法操作簡(jiǎn)單、快速，很受實(shí)驗(yàn)室人員歡迎，但實(shí)驗(yàn)室污染也并未因此得到解決。

　　之后出現(xiàn)的四、五代試劑盒技術(shù)出現(xiàn)解決了往代試劑盒存在的缺陷，是為臨床熒光PCR技術(shù)的一場(chǎng)革命。